【小鼠大学问】采血,这些知识也许你还不知道
小鼠的循环血量大约是72ml/kg
小鼠的循环血量大约是72ml/kg。以25g的成年小鼠为例,它的循环血量大约为1.8ml。
大鼠的循环血量大约是64ml/kg。以250g的成年大鼠为例,它的循环血量大约为16ml。
采集10%的循环血量之后,大约需要2周时间恢复
状况良好的小鼠一般采血量建议不超过循环血量的10%。有研究表明失血超过15%以上实验动物会发生血量减少性休克。以25g的成年小鼠为例,10%的循环血量大约是0.2ml。
采血之后,小鼠需要一段时间的恢复,其血液指标才会恢复到正常水平。下面的表格列出了不同采血量对应的恢复期:
如果需要多点采血,每周最大采血量最好不超过循环血量的7.5%;每两周最大采血量不超过循环血量的10%。
全血、血浆、血清的区别
全血
包括血细胞和血浆的所有成分。采集全血时,收集管中必须含有抗凝剂。常用的抗凝剂有:肝素、柠檬酸钠和乙二胺乙酸酸 (EDTA)。根据不同研究需要进行选择。
血浆
是全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,获得的不含细胞成分的液体。含有纤维蛋白原、凝血因子等。
血清
是全血未经过抗凝处理,血凝块聚缩释出的液体。其中没有纤维蛋白原和凝血因子。
分离血浆和血清的一般方法是:2200-2500rpm 离心至少15分钟。
眼眶静脉丛采血之前,需要麻醉小鼠
眼眶静脉丛采血之前,必须麻醉小鼠。通常需要全身麻醉。
如果不能全身麻醉,那在操作之前,可以用丙美卡因或丁卡因对眼部进行局部麻醉。
眼眶静脉丛采血法具有采血成功率高,小鼠死亡率低,血流较快,采血量多,伤口较小的优点。但用这种方法不能采集到无菌的血样,血液中可能混有眼窝内的组织液和腺体分泌物。
如果需要多次采血,为保证小鼠的伤口愈合,两次采血之间应有10-14天的间隔。如果操作不当或对同一只眼多次采血,可能引起一些并发症,如眼出血、炎症和失明等。
比眼眶静脉丛采血更适合多次采血的方法是?
颌下静脉采血或隐静脉采血,这两种采血方法在操作前都不需要麻醉。而且对小鼠的伤害小,采血量与眼眶静脉丛采血法相当,采血后恢复快。所以比眼眶静脉丛采血更适合多次采血。
给小鼠采血还有哪些方法呢?应该如何选择?
从小鼠不同的部位采血,大致有以下几种常用的采血方式:
尾尖采血、眼眶静脉丛采血、颌下静脉采血、隐静脉采血、心脏采血。
这些采血方式应该怎么选择呢?看了它们各自有什么特点,你大致就有概念了。
1、Guidelines for the survival bleeding of mice and rats.(2010).
2、Diehl K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J.Appl.Toxicol.21,15-23(2001).
3、Janet H, et al. Methods of Blood Collection in the Mouse.Lab Animal.29 (10):47-53.(2010).
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