【小鼠大学问】让繁育快快快的秘方!


什么是快速繁育

我们说的快速繁育就是指使用极少数的雄鼠来获得大量同一周龄子代小鼠。

快速繁育的原理是什么?

其实快速繁育的核心就是体外受精IVF, in vitro fertilization)—— 采用体外培养的方式,将激活后的精子与卵母细胞进行体外受精并移植入假孕母鼠体内,获得子代小鼠。


IVF 的优势:用四个字来形容,那就是:多快好省

  • 多:在相同的时间里,利用相同数量的父代小鼠,通过 IVF 方法可以获得更多的子代小鼠。

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  • 快:大大节约繁育周期,一般自然繁育一代的周期为3个月,而 IVF 仅需1.5个月

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  • 好:同批获得的子代小鼠周龄差异不会超过7天降低了由于小鼠周龄差异导致的实验误差,实验数据更可靠

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  • 省:只需要2只雄鼠,就可以获得足够数量的子代。省时省力,解放人力,节约了大量的繁育时间同时也优化了繁育方式。

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哎唷,看上去很厉害的样子!快速繁育到底有多快,让数字说话~

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图表1. 快速繁育 vs 常规繁育 周期对比,注:同时获得的小鼠周龄差距在一周之内


IVF Protocol

1.培养皿准备

HTF:在35mm皿中做200ul的HTF微滴2个,上覆矿物油。

2.精子的采集
(1) 将符合要求的性成熟(8周以上)的雄鼠颈椎脱臼处死,取出附睾上体尾部,去除脂肪与血迹后,置于HTF液内。

(2) 利用眼科剪在液滴内横断附睾尾,当精子充分游离出附睾尾后,将组织从液滴内取出,将培养皿置于培养箱。

3.卵母细胞的收集

处死超排后的雌鼠,取出两侧的输卵管,用显微镊将卵母细胞团拨到受精滴中。

4.精卵混合

用10ul移液器从精子滴吸取精子,加到卵子滴中,根据卵团大小情况以及精子的活力每滴加8ul左右的精子。将精卵混合后,把培养皿置于培养箱中培养。

除了快速繁育,下方的小鼠净化及保种技术服务也会经常用到哦~

净化服务

由于各种原因,小鼠可能被病原感染,并传播感染其他品系的小鼠,从而危及感染小鼠的健康,混淆研究成果。我们的净化服务将为您解除这种烦恼,提供符合SPF级要求的小鼠。您只需提供雄鼠,与超排后的雌鼠进行交配,48小时左右取出2-cell的受精卵移植入SPF级受体体内,出生小鼠进行基因型鉴定。

胚胎保种服务

将指定品系的基因工程小鼠与超排的雌鼠交配,取2-cell期胚胎,并采用程序降温的方法进行胚胎冻存,保存在液氮中。

胚胎复苏服务

冷冻保存的胚胎经复苏后移植到假孕母鼠体内(输卵管移植或子宫移植),受体鼠及新生鼠均维持在SPF级小鼠饲养环境中,进行仔鼠出生记录及基因型鉴定等。



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