品系名:C57BL/6Smoc-Gt(ROSA)26Sorem1(CAG-Loxp-2xKRAB-dCas9-IRES-EGFP)Smoc
品系状态:精子冻存 | 目录号:NM-KI-18007
将CAG-LSL-2xKRAB-dCas9-IRES-EGFP-WPRE-pA插入到小鼠Rosa26基因中,建立CRISPRi基因表达调控工具小鼠。该小鼠已去掉stop。
CRISPRi是基于一个没有核酸酶活性的dCas9蛋白,当dCas9被引导到某个基因的转录起始位点TSS(transcription start site)时,dCas9能够物理性阻碍RNA聚合酶的通过,导致基因沉默。为了进一步提高转录抑制的效率,dCas9可以融合一些基因抑制结构域,如KRAB(krüppel-associated box)结构域,强化抑制效果。